皮膚變態反應（致（zhì）敏）試驗儀 文章

　

皮膚變態（tài）反應（致敏）試驗（yàn）儀

皮膚變態反應（致敏）試驗儀

 

一、 儀器介紹

​實驗目的：

確定重複接觸（chù）受試物對哺乳動物是否可引起皮膚變態反應及其程度

試驗概述：  

局部封閉塗皮試（shì）驗（Buehler test，BT）和豚鼠最大值試驗（uinea pig maximisation test，GPMT）是實驗（yàn）動物通過多次皮膚塗抹（誘導接觸）或皮內注射受試物10d~14d（誘導階段（duàn））後,給予激發劑量的受試（shì）物,觀察實驗動物,並與對（duì）照動物比較（jiào）對激（jī）發接觸受試物的皮膚反應強度。

小（xiǎo）鼠局部淋（lín）巴結分析試驗（locallymph node assay，LLNA）是通過（guò）耳部給予實驗動物受試物,引起淋巴結的淋巴細胞增生,淋巴細胞增生與（yǔ）受試物劑（jì）量（liàng）（過敏程度）成比例。利用放射性標記（jì）方法,測定試驗組與對照組淋巴細胞的（de）標記率,並進行對比,獲（huò）得刺激指數,評價致敏強度。應用範圍

應用於科研、農業、衛生、教育、霧霾狀態可吸入顆粒染毒效果研究等各個領域（yù）

符合標準：

GB/T 15670.9-2017《農藥登記毒理學試驗方法第9部分皮膚變態反應（致敏）試驗》

二、試驗步驟（zhòu）:

1. Buehler Test（BT） 

動物模型:豚鼠

操作步驟:

誘導階段:通過封（fēng）閉式皮膚塗（tú）抹受試物（wù），持續10-14天。激發階段:間隔後再次塗抹受試物，觀察皮膚反應。

觀察指（zhǐ）標:紅斑、水腫等皮膚炎症反（fǎn）應的強度(主觀評分)

優點:

模擬人類皮膚接觸途徑，適用（yòng）於局部製劑(如化妝品、外用藥物)

無需注射，操作相對溫和。0

缺點:

敏感性較低，可能漏（lòu）檢弱致敏物，。依賴主觀（guān）評分，存在實驗者偏差（chà）。0應用場景:傳統化妝品（pǐn）、外（wài）用藥品（pǐn）的安全性評估。

 

2.豚鼠最大值試驗（GPMT）

動物模型（xíng）:豚鼠

操作步驟:

誘導階段:皮內注射受（shòu）試物（常聯合（hé）弗氏完全佐（zuǒ）劑）結合（hé）皮膚塗（tú）抹，持續10-14天。

激（jī）發階段（duàn）:再次塗抹（mò）受試（shì）物，評（píng）估皮膚反（fǎn）應。

觀（guān）察指標:與BT類似，但反應更強烈（liè）(紅斑、水腫（zhǒng）、硬結)

優點:

敏感性高，可檢（jiǎn）測強致敏（mǐn）物（wù）和弱致（zhì）敏物;

國際公認的“金標準”，尤其適用於化學品和工業原料。

缺點（diǎn）:

使用佐劑可（kě）能（néng）引發過度免疫反（fǎn）應，導致假陽性;

動物痛苦程（chéng）度較高，倫理爭議較大。

應用（yòng）場景:工業化學（xué）品、強致敏性物質(如染發劑、橡膠添加劑)的嚴格檢測。

 

3.小鼠局部淋巴結試驗（LLNA）

動物模型:小鼠.

操作步驟:

誘導階段:連（lián）續3天耳部塗抹受試物。

檢測指標:通過3H-胸苷或BrdU標記（jì）增殖的（de）淋巴細胞，計算刺激指數（SI）觀（guān）察指標:淋巴結淋巴細胞增殖程度（SI>3判為陽性）

優點:

客觀定量:減少主觀評分誤差；

符合3R原則:動物用量少，無需激發階（jiē）段，痛苦小;

高效快速:試驗周期短(約1周)。

缺點:

對某些物質(如金屬鹽（yán）)敏感性不足，需使用放射性物質或特殊設備，成本較高。

應用場（chǎng）景:歐盟等法規（guī）優（yōu）先推薦的（de）替代方法，廣泛用於藥品、化妝品及化（huà）工（gōng）產品的初篩。